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碳水化合物水平對厚唇弱棘?生長和血液指標的影響
摘要：配制等蛋白質(zhì)、等脂肪、不同碳水化合物水平(質(zhì)量分數(shù)分別為26％、30％、34％、38％、42％)的5組(記為A、B、C、D、E組)飼料，在網(wǎng)箱中養(yǎng)殖厚唇弱棘蜊Hephaestusf~igi／／OM／．$(初體重為4．02g±0．11 g)60 d，探討碳水化合物對其生長和血液指標的影響。結(jié)果表明：C組厚唇弱棘蜊的特定生長率和飼料效率顯著高于其它各組(P<0．05)；E組魚血漿中總蛋白濃度顯著低于其它各組(P<0．05)，各組間白蛋白和球蛋白濃度無顯著差異(P>0．05)；E組魚血漿中血糖、甘油三酯和膽固醇濃度顯著高于其它各組(P<0．05)；各組魚血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性隨著飼料中碳水化合物水平的上升而逐步增高，但無顯著差異(P>0．05)，各組間堿性磷酸酶活性也無顯著差異(P>0．05)。綜合各項生長和血液指標分析：厚唇弱棘蜊對飼料中碳水化合物的適宜需求量為34％ ～38％ 。
關(guān)鍵詞：碳水化合物；厚唇弱棘蜊；生長；血液指標
碳水化合物是動物必需的三大能源物質(zhì)之一，在魚體內(nèi)具有不可替代的生理作用¨J。魚類血液指標同機體代謝、營養(yǎng)狀況和疾病免疫密切相關(guān)，當魚體受到外界因子的影響而出現(xiàn)生理或病理變化時，會在血液指標中反映出來 j。飼料中碳水化合物的含量能影響魚類對血糖的調(diào)節(jié)能力，并可能導(dǎo)致一些病變 j。糖含量過高會導(dǎo)致虹鱒On—corhynchus mykiss出現(xiàn)持續(xù)的高血糖，并損壞肝功能 J。青魚Mylopharyngodon piceus口服高濃度葡萄糖后，血漿中甘油三酯濃度呈先增加后降低的趨勢 J，翹嘴紅鮐Erythroculter erythropterus攝食高糖飼料后，其血漿中的膽固醇濃度顯著提高 J。
厚唇弱棘蜊Hephaestus． 2iginosus俗稱淡水黑鯛，原產(chǎn)于澳大利亞，屬亞熱帶雜食性魚類。該魚具有生長快、體形佳、肉質(zhì)嫩滑爽口、無肌間刺、含肉率高、飼養(yǎng)方便等優(yōu)點，深受廣大養(yǎng)殖戶和消費者的青睞 J。中國引進厚唇弱棘蒯的時間較短，對其研究還不深入，僅見宋理平等 對其蛋白質(zhì)需求量的報道，而關(guān)于碳水化合物水平對其生長和血液指標的影響國內(nèi)外均未見報道。本試驗中，作者探討了不同碳水化合物水平對厚唇弱棘蒯生長和血液指標的影響，以期確定該魚對飼料中碳水化合物的適宜需求量，為其配合飼料的研制提供參考資料。
1 材料與方法
1．1 材料試驗用厚唇弱棘蜊取自山東省淡水水產(chǎn)研究所，為當年繁殖的同一批次，于玻璃鋼水槽內(nèi)(r= 2．5 ITI，h=1．5 m)暫養(yǎng)14 d，期間投喂碳水化合物質(zhì)量分數(shù)為26％ 的飼料進行馴化。
試驗飼料分別以白魚粉、魚油和玉米淀粉作為蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物來源，以微晶纖維素作為飼料填充物，制成蛋白質(zhì)和脂肪含量相近，而碳水化合物的質(zhì)量分數(shù)分別為26％、30％、34％ 、38％ 、42％ (記為A、B、C、D、E組)的5組飼料(粒徑為1．8 mm)。各組試驗飼料配方及營養(yǎng)成分。
1．2 方法
1．2．1 飼養(yǎng)與日常管理暫養(yǎng)結(jié)束后，選取300尾體重為(4．02±0．11)g的健康厚唇弱棘蜊，隨機放入15個聚乙烯網(wǎng)箱(60 em×6O C1TI x 120cm)中，每個網(wǎng)箱中放2O尾試驗魚。所有網(wǎng)箱均垂直掛于大型玻璃鋼水槽內(nèi)，分別投喂5組不同飼料，每組設(shè)3個重復(fù)。每日飽食投喂3次(7：o0，12：3O，18：oo)，若有死魚及時撈出并計數(shù)。試驗水源為玉景礦泉水廠700 In深的井水。試驗期間，24 h充氣，并保持水溫為(27．0±1．5)℃ ，pH為7．5±1．0，NH3一N <0．4 mg／L，H2 S<0．05 mg／L。每7天換水一次(換水量為1／3)，并清理糞便和殘餌，養(yǎng)殖試驗共進行60 d。
1．2．2 樣品的采集與分析試驗結(jié)束后，停食24h，對每個網(wǎng)箱中所有試驗魚稱重。每個網(wǎng)箱隨機取5尾魚，用MS一222麻醉后，于尾靜脈處采血，血樣用肝素抗凝，在4℃下離心10 min(10 000r／min)，取上清液移人凍存管并凍存于液氮中備用。血漿中總蛋白、血糖、甘油三酯濃度和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性等各項指標均采用美國貝克曼cx一24型自動生化分析儀測定。
采用凱氏定氮法測定粗蛋白；采用索氏抽提法測定粗脂肪；用3，5一二硝基水楊酸法測定總糖；用焚燒法(馬福爐中550℃)測定粗灰分。
1．3 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計采用SPSS 17．0軟件對各組數(shù)據(jù)進行方差分析和Duncan’s多重檢驗，尸<0．05為顯著差異。特定生長率= 苤 毳 蝗× oo％；飼料效率= ×lo0％。
2 結(jié)果
2．1 碳水化合物的水平對厚唇弱棘蜊特定生長率和飼料效率的影響從表2可見：C組厚唇弱棘蜊的特定生長率顯著高于其它各組(P<0．05)，D組和E組顯著高于A組(P<0．05)，與B組無顯著差異(P>0．05)；C組厚唇弱棘蜊的飼料效率顯著高于其它各組(P<0．05)，D組飼料效率顯著高于A組(尸<0．05)，與B組和E組無顯著差異(P>0．05)；各組問成活率無顯著差異(P>0．05)。
2．2 碳水化合物的水平對厚唇弱棘蜊血液中生化指標的影響從表3可見：E組厚唇弱棘蜊血漿中總蛋白濃度最低(41．42 g／L)，顯著低于其它組(P<0．05)；隨著碳水化合物水平的升高，各組魚血漿中自蛋白和球蛋白濃度呈上升趨勢，其中E組魚血漿中自蛋白和球蛋白濃度最高，分別達到l7．05g／L和30．73 g／L，但組間均無顯著差異(P>0．05)。
從還可見：E組魚血漿中血糖濃度最高，顯著高于其它各組(P<0．05)；血漿中甘油三酯和膽固醇濃度均隨飼料中碳水化合物水平的上升而增大，E組甘油三酯濃度顯著高于其它組(P<0．05)，其余各組之間無顯著差異(P>0．05)；E組魚膽固醇濃度顯著高于其它組(P<0．05)，D組膽固醇濃度顯著高于A組和B組(P<0．05)。
2．3 碳水化合物水平對厚唇弱棘芻剌血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶活性的影響從表4可見：隨著碳水化合物水平的上升，各組厚唇弱棘側(cè)血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性也逐步升高，但各組間無顯著差異(P>0．05)；各組魚血漿中堿性磷酸酶活性無顯著差異(P>0．05)，且未見明顯的變化趨勢。
3 討論
魚類對碳水化合物的利用能力較差 引，但其飼料中應(yīng)含有適量的碳水化合物 。如添加量不足，蛋白質(zhì)和脂肪就會被分解用于能量供應(yīng)和合成一些可由碳水化合物衍生而來的生物活性物質(zhì)(如非必需氨基酸和核酸)，造成魚類代謝紊亂，魚體消瘦，生長性能下降 。但當魚類攝食的飼料中碳水化合物水平過高時，魚體血糖濃度持續(xù)偏高n ，代謝負荷加重 引，同樣會導(dǎo)致魚體的生長率和飼料效率降低 J。本試驗中，C組厚唇弱棘蜊的特定生長率和飼料效率顯著高于其它各組，與同為雜食性的鯉Cyprinus carpio、羅非魚Aeromonas hydrophila、異育銀鯽Carassius auratusgibelio和寶石鱸Scortum barcoo對飼料中碳水化合物的適宜需求量相近¨卜馴。碳水化合物水平過高影響了厚唇弱棘蜊的生長和飼料利用，可能是由于部分魚類(如鯉 )腸道中淀粉酶活性不隨飼料淀粉水平的提高而上升 ，過高的糖水平反而抑制了腸道內(nèi)氨基酸的吸收和轉(zhuǎn)運，致使飼料效率下降 ，厚唇弱棘蜊可能屬于此類。
魚類血液指標受到多種因素的共同影響，同機體代謝、營養(yǎng)狀況及疾病免疫密切相關(guān) 。總蛋白是血漿固體成分中含量最多的一類物質(zhì)，其增高主要是血漿中水分減少，使總蛋白濃度相對增高；而肝功能障礙、營養(yǎng)不良或消耗增加等易造成總蛋白降低 J。隨著飼料中脂肪水平的上升，南方鲇Silurus meridionalis血漿中總蛋白濃度顯著下降 引。
本試驗結(jié)果表明，攝食高碳水化合物飼料的厚唇弱棘蜊血漿中總蛋白的濃度顯著降低。究其原因，一方面可能是由于碳水化合物除滿足機體供能外，過量的部分可有限地轉(zhuǎn)化為脂肪微粒，并減少脂肪用于供能的損耗，加大了脂肪的貯存? ；另一方面，碳水化合物向脂肪的轉(zhuǎn)化過程中加重了肝臟的負擔，造成肝損傷或干細胞被破壞，影響了肝臟合成血漿蛋白的功能 ，導(dǎo)致厚唇弱棘蜊血漿中總蛋白降低。白蛋白是由肝實質(zhì)細胞合成，具有維持血漿膠體滲透壓的恒定和運輸?shù)墓δ堋游镌诨妓懈文懠膊r，幾乎球蛋白都會增高 。本試驗中高碳水化合物組厚唇弱棘俐白蛋白和球蛋白濃度雖與其它各組無顯著差異，但其數(shù)值是最高的，可能是攝食高碳水化合物飼料后，肝膽負擔加重所致。
魚體的血糖常處于動態(tài)平衡狀態(tài)，但又極易受環(huán)境因子刺激而發(fā)生波動，如溫度、潛水、運動、攝食和光周期等許多因素均可對其產(chǎn)生影響 引。
本試驗中，攝食高碳水化合物水平的魚體內(nèi)血糖濃度顯著高于其它各組，這與碳水化合物對翹嘴紅鮐 和南方鲇幼魚。血液指標的影響結(jié)論相近。
說明一定時間內(nèi)魚體血糖濃度與其攝食碳水化合物水平呈正相關(guān)，可能是飼料中高水平的碳水化合物在一定程度上提高了魚類某些糖代謝酶的活性。甘油三酯和膽固醇是血脂的重要組成部分，具有供給能量、合成某些酶、維生素和激素等作用，為維持正常生命活動所必需 。目前，有學(xué)者針對魚體饑餓后甘油三酯和膽固醇的變化情況做了大量研究 。本試驗中，攝食高碳水化合物的試驗魚體內(nèi)甘油三酯和膽固醇濃度顯著高于低碳水化合物組，與翹嘴紅鮐攝食高碳水化合物飼料后其甘油三酯和膽固醇濃度升高相近 。這可能是因為過剩的碳水化合物轉(zhuǎn)化為脂肪，同時增加了血液中的脂肪含量，提高了血脂指標。但王芬等 對異育銀鯽和吳建開等 對軍曹魚Rachycentron canadum的研究結(jié)果中，甘油三酯濃度均隨飼料中碳水化合物水平的升高而下降。造成這種結(jié)果差異的原因，可能是試驗魚的種類、體重、飼料和養(yǎng)殖環(huán)境不同。
谷草轉(zhuǎn)氨酶在心肌細胞中的含量最高，但當動物肝臟損害時其血漿濃度也可升高。谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟、心臟和骨骼肌中，肝細胞或某些組織損傷或壞死，都會導(dǎo)致血液中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高，二者常作為評價肝功能的標志酶 ]。本試驗中，隨著碳水化合物水平的增加，各組魚血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性雖無顯著差異，但呈現(xiàn)上升趨勢，再次說明高碳水化合物飼料對厚唇弱棘俐的肝功能有一定的負面影響。堿性磷酸酶廣泛分布于魚類前腸上皮細胞的淺部和紋狀緣上，其在體內(nèi)直接參與磷酸基團的轉(zhuǎn)移和代謝，與脂類、葡萄糖、鈣和無機磷的吸收存在正相關(guān)性，參與水生動物的骨骼礦化過程，在魚類營養(yǎng)的吸收與利用中發(fā)揮著重要的作用 引。有關(guān)魚類營養(yǎng)對血漿中堿性磷酸酶活性的影響有待進一步研究探討。
本試驗條件下，綜合考慮碳水化合物對厚唇弱棘蜊生長性能、飼料利用和血液指標的影響，確定該魚對飼料中碳水化合物的適宜需求量為34％ ～38％。
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